PCR实验室有哪些分区?PCR实验室分区的功能是什么?
原标题:PCR实验室有哪些分区?PCR实验室分区的功能是什么?
PCR实验室分为四个区域 , 进入各工作区域必须严格按照单一方向进行 , 不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色) 。 工作人员离开各工作区域时 , 不得将工作服带出 , 四区域分别为:1.试剂配制区2.样品处理区3.核酸扩增区4.产物分析区如使用全自动分析仪 , 区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析 。 
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配图1PCR实验室效果图
各区的功能:完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件 , 应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器 , 如超净工作台、离心机、加样器等 。
PCR实验室并没有严格的净化要求 , 但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性 , 宜采用全送全排的气流组织形式 。 同时 , 要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求 。
1、试剂贮存和准备区该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备 。 试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区 , 不得经过其他区域 。 试剂原材料必须贮存在本区内 , 并在本区内制备成所需的贮存试剂 。 对与气流压力的控制 , 本区并没有严格的要求 。 
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配图2PCR实验室分区
【PCR实验室有哪些分区?PCR实验室分区的功能是什么?】2、标本制备区该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成 。 本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压 , 以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染 。 另外 , 由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染 , 所以应避免在本区内不必要的走动 。
3、扩增反应混合物配制和扩增区该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增 。 此外 , 已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行 。 在巢式PCR测定中 , 通常在第一轮扩增后必须打开反应管 , 因此巢式扩增有较高的污染危险性 , 第二次加样必须在本区内进行 。 本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压 , 以避免气溶胶从本区漏出 。 为避免气溶胶所致的污染 , 应尽量减少在本区内的不必要的走动 。 个别操作如加样等应在超净台内进行 。
4、扩增产物分析区该区域主要进行的操作为扩增片段的测定 。 如使用全自动封闭分析仪器检测 , 此区域可不设 。 本区是最主要的扩增产物污染来源 , 因此对本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压 , 以避免扩增产物从本区扩散至其它区域 。
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