别提了，我价值千金的小鼠不孕不育了... 这个 BUG 深入骨（ji）髓（yin）"

基因敲除小鼠作为研究基因功能重要工具，应用十分广泛，然而实际操作中大家常常遇到这样问题：

小鼠之友：

@雪白毛球：靶基因敲除造成小鼠胚胎致死无法生育。

@实验室我最大：研究靶基因在某一阶段或者某一个组织的表达情况，全敲小鼠并不能满足我们的研究要求。

条件性基因敲除小鼠（CKO）就应运而生了，完美地解决了上面 2 个棘手问题。

条件性敲除小鼠

条件性敲除小鼠（Conditional knockout mice, CKO）使靶基因缺失仅发生于小鼠生命周期的某一阶段或某一特定的组织，而在其它组织或细胞表达正常，从而使对小鼠基因组的修饰的范围和时间处于一种可控状态。

? 全敲和条件性敲除的对比：

× 常规基因敲除的局限性

√ 条件性基因敲除的优点

? 胚胎致死

? 防止胚胎致死

? 所有细胞都改变

? 特定组织

? 功能代偿与冗余

? 特定时期

技术原理

通过染色体位点特异性重组酶系统 Cre-LoxP 或 Flp-FRT 来实现的。在待敲除目的基因一个或多个重要外显子两端各放置一个 LoxP（或 FRT）序列，得到 flox（Flankedby LoxP) 小鼠。将 flox 小鼠与带有组织特异性表达的 Cre（或 Flp）的小鼠交配繁殖，以获得在特定组织里把目标基因敲除掉的小鼠，即条件性基因敲除小鼠。

应用

1. 用于具有胚胎致死性目的基因的研究：如 Kras 基因具有胚胎致死性，以该基因敲除作癌症相关研究就需要构建条件性基因敲除鼠。

2. 用于研究基因在特定的组织的生理病理功能：同一个基因在不同组织的功能并不完全一样， CKO 模型可以更准确地研究某个基因在某种组织的作用。

3. 与控制 Cre 表达的其它诱导系统相结合，还可以对某一基因的表达同时实现在时间和空间两方面的调控。

条件敲除小鼠与常规基因敲除小鼠相比，过程更加复杂，周期也会更长，一般获得 F0 代需要 4～6 个月，F1 代 6～8 个月。但是它解决了基因胚胎致死难题，还可以实现基因在特异组织或者特定时间的表达，是精准研究靶基因功能重要工具。邦耀生物的新一代条件敲除技术可以真正解决这些难题，心急的学霸直接拉到底部「阅读原文」查看更多吧。

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「新一代」条件敲除技术

? 更高的成功率（同源重组率高达 70%）；

? 更短的制备周期（F1 代快至 6 个月）；

? 更多子代选择（不少于 3 只 F1 代大小鼠）；

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文章来源：邦耀生物

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